明胶包被实验方案

2024-07-13

明胶是胶原蛋白的一种分子衍生物，通过对来自牛皮的胶原蛋白进行碱性或酸性消化而合成。明胶是一种水状胶体，富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸，具有结构稳定性。明胶可为细胞培养提供理想的细胞附着基质。最适浓度取决于细胞类型和研究对象。

明胶生产方法分为酸法(A型)和碱法(B型）。普西唐明胶基本为酸法明胶。

包被前重要注意事项：

确保细胞健康且数量充裕。

明胶溶液需要在包被前在37°C下完全液化。

明胶溶液可2-8°C无限期保存；高温会导致水解和完整性损失。

常用表面覆盖浓度为100 – 200 µg/cm2。表面覆盖浓度可能因培养细胞而异。必须确定每种细胞系和应用的最佳附着条件。

包被之后切勿过度干燥，否则会破坏明胶结构并影响细胞附着。

包被实验方案：

1：将明胶溶解在组织培养级水中，制备2％（w / v）溶液。

2：在121°C、15 psi下高压灭菌30分钟。

3：5-10 µL明胶溶液/cm2（即100-200 µg/cm2）包被培养表面。

4：在加入细胞或培养基之前至少干燥2小时。

5：也可使用明胶溶液(PS0503)直接包被培养皿。